Análisis molecular de Sonic hedgehog (Shh) en la etiología de la fisura labiopalatina no sindrómica en tríos caso-progenitores chilenos / Molecular analysis of Sonic hedgehog (Shh) in the etiology of nonsyndromic cleft lip and palate in Chilean case-parent trios

introducción: la fisura labio palatina no sindrómica, NSCLP (del inglés Nonsyndromic cleft lip and palate) es una de las malformaciones congénitas más frecuentes tanto en Chile como en el resto del mundo. Presenta un modo de herencia multifactorial, en la que interactúan varios genes y el medio ambiente. Evidencias experimentales han demostrado la participación de Sonic hedgedhog (Shh) en la migración de las células de la cresta neural, en la transformación epitelio-mesénquima y en la formación de las estructurasmedias craneofaciales durante el desarrollo embrionario, es probable una asociación entre variantes de Shh y la NSCLP. Métodos: el objetivo de este trabajo fue evaluar las regiones exónicas e intrónicas adyacentes de Shh, en una muestra de 150 tríos caso-progenitores para hallar la asociación con NSCLP. Se utilizó el método PCR-RFLP para determinar la presencia de heterodúplex. Luego, se utilizó la técnica de Conformation Sensitive Gel Electrophoresis (CSGE) para ver la distorsión del ADN en los heterodúplex. Como método alternativo, se hizo un análisis de polimorfismos de un solo nucleótido (del inglés single-nucleotide polymorphism SNP) para determinar asociación entre NSCLP y Shh, para lo cual se utilizaron los SNP: rs1233555 y rs1233556, ubicados en el primer intrón de Shh. Resultados:no se observaron heterodúplex en ninguno de los segmentos de Shh analizados en 150 tríos, el análisis de SNP tampoco mostró asociación con Shh y FLPNS. conclusión: la no asociación puede deberse a que la frecuencia de distribución de los SNP en la población chilena es diferente a la de las poblaciones referidas, o a que el número de SNP analizados fue insuficiente, o la no inclusión para el análisis de otras regiones de Shh.

introduction: nonsyndromic cleft lip and palate (NSCLP) is one of the most common congenital malformations not only in Chile but also worldwide. It has a multifactorial inheritance pattern with interaction of several genes and the environment. Several experimental studies have proven the participation of Sonic hedgedhog (Shh) in the migration process of cells from the neural crest,in the epithelium-mesenchyme transformation, and in the formation of middle craniofacial structures during embryo development; an association between Shh variants and NSCLP is probable. Methods: the goal of this study was to evaluate both exonic and intronic regions adjacent to Shh, in a sample of 150 case-parent trios in order to find possible associations with NSCLP. The PCR-RFLP method was used to determine the presence of heteroduplex. Afterwards, the Conformation Sensitive Gel Electrophoresis (CSGE) technique wasused to visualize DNA distortion at the heteroduplexes. As an alternative method, a single-nucleotide polymorphism (SNP) analysis wasperformed in order to determine NSCLP-Shh associations, by means of these SNPs: rs1233555 and rs1233556, located at the first Shhintron. Results: no heteroduplexes were found in any of the analyzed Shh segments in 150 trios; SNP analysis did not show associations between Shh and NSCLP either. conclusions: this lack of association may be due to the fact that SNP distribution frequency among Chilean population is different to that of reference populations, or because the number of SNPs analyzed was not sufficient, or even because this study did not include other Shh regions.

Estudio de asociación por desequilibrio de ligamiento entre los genes TGFA, RARA, y BCL3 y fisura labiopalatina no sindrómica (FLPNS) en la población chilena / Possible association due to linkage disequilibrium of TGFA, RARA and BCL3 with nonsyndromic cleft lip with or without cleft palate in the Chilean population

Background: Nonsyndromic cleft lip/palate (NSCLP) is a congenital malformation with the characteristics of a complex genetic trait. Based on experimental evidences as well as on association and linkage studies candidate genes TGFA, RARA and BCL3 have been postulated as being involved in the genetic etiology of this pathology. Aim: To test the possible association due to linkage disequilibrium between microsatellite markers located at less than 1cM from the three candidate genes and nonsyndromic cleft lip/palate using the case-parents trio design. Patients and Methods: The sample consisted of 58 case-parents trios. Two microsatellite markers, flanking each one of the candidate genes were analyzed by means of the polymerase chain reaction (PCR) with fluorescent labeled microsatellite markers. Electrophoresis of the PCR products was performed on a laser-fluorescent automatic DNA sequencer. Nonparametric ETDT was used to analyze the genotype data. Results: Significant linkage disequilibrium was detected between D2S443 (TGFA) and NSCLP. Significance was almost reached between D17S800 (RARA) and NSCLP. Alleles 239bp (D2S443) and 172bp (D17S800) showed significant preferential transmission from heterozygous parents to affected offspring. In the case of BCL3 both markers showed no significant results. Conclusions: The results of the present study do not show clear evidence that TGFA or RARA could be involved in the genetic etiology of NSCLP. Even though the importance of retinoic acid in the development of the embryo is well documented the results obtained for RARA are difficult to analyze. In relation to the possible role of BCL3 in NSCLP, recent information postulates that other genes located in the same chromosome region could be involved in NSCLP.

Agentes medioambientales en la susceptibilidad a las fisuras faciales en el norte de Chile / Environmental agents in facial clefts susceptibility in the north of Chile

En dos hospitales de la II Región, el de Calama y el de Chuquicamata, se analizó la incidencia de fisuras labiales con o sin fisura palatina y de fisura palatina sola. Una tasa de fisuras de 1,47 por mil RNV entre los 17.687 nacimientos consecutivos fue determinado en los dos hospitales. Las tasas por hospital variaron considerablemente obteniéndose en Calama una tasa de 1,07 x 1.000 y en Chuquicamata de 2,37 x 1.000 RNV, la más alta encontrada en Chile. El porcentaje de mezcla indígena de las poblaciones hospitalarias, basado en el estudio de las frecuencias de los grupos sanguíneos ABO y Rh(d) indican que ambas poblaciones tienen un alto, pero similar grado de mezcla (47,1 y 49,1 por ciento, respectivamente). Al correlacionar los grados de mezcla indígena con las tasas de fisuras obtenidas en otros estudios, se aprecia que en Calama el valor es menor a lo esperado, lo que podría estar relacionado con el medio ambiente estresante de la zona

Indice de placa y cambios inflamatorios a nivel gingival en pacientes con sindrome de Down y en poblaciones controles / Plaque index and gingival inflammatory changes in Down's syndrome patients and control populations

Se realizó un estudio de corte transversal para determinar los grados de inflamación gingival existentes en pacientes con sindrome de Down y analizar la contribución que la placa bacteriana y otros factores oexógenos teinen en la etiología de este proceso. Se examinaron 83 pacientes con trisomía 21 y dos grupos controles constituidos por 81 pacientes con retardo mental no asociado al sindrome y 80 individuos normales. El 100 por ciento de los niños Down examinados presentó algún grado de inflamación gingival, observándose en este grupo una mayor prevalencia de inflamación gingival moderada (grado 2) con respecto a los grupos controles (X al cuadrado = 7,3, p = 0.025). Los pacientes Down presentaron más placa bacteriana grados 2 y 3 que los grupos controles (x al cuadrado = 13,83, p = 0,01). Al relacionar el índice de placa con los niveles de clasificación socioeconómica, se observó que en el grupo Down los niveles socioeconómicos más bajos presentaron porcentajes de placa del mismo orden de magnitud que los más altos, situación que difiere de lo observado en los grupos controles. Se obtuvieron resultados similares al relacionar los grados de inflamación gingival con los niveles socioeconómicos. El mayor grado de inflamación gingival presente en los pacientes trisómicos estaría asociado al desarrollo de una mayor cantidad de placa bacteriana. Dado que no se observó mejoría de las condiciones periodontales en los niveles socioeconómicos más altos en el grupo Down, se propone que el desarrollo de mayor cantidad de placa no dependería en forma importante de la higiene bucal, siendo más relevante el estado de las mucosas, el que está relacionado con características dependientes del sindrome